Protizánětlivý účinek některých Proteinic Hydrolisates.

(Vydáno v “LIFE CARE”, Ne. 6, 1989, Jednou. 227-281)
M.R.Simionovici, Niculina Boesteanu, Dan Florica, Carmen Gheorghiu, Marilena Teodorescu, Pro. Chirita
(Chemický-Pharmaceutical Research Institute, Bukurešť), A.G.Savulescu (Nemocnice Baloteşti, Ilfov)


 
Shrnutí.

Protizánětlivý účinek některých proteinic hydrolisates (PL) byla testována na experimentálních modelech zánětu s karagenu na krysách a Freud adjuvantní artritidy u krys a prasat na guineea. PL-S jsou: PL1 (koňské sérum hydrolyzát), PL2.1 a PL2.2 (caseine hydrolyzát). Hydrolyzát má jako účinnou látku, určité množství a kvalitu polypeptidů s malou molekulovou hmotností vyhnout antigenicity, vyhnout pyrogenní látky s velmi malou toxicitou. Všechny tři PL-S testovány měl protizánětlivé účinky. PL1 a PL2.1 měl velmi příznivý terapeuticky hodnotu.

Tyto výsledky mohou otevřít nové terapeuticky způsob zánětlivých syndromů, a to zejména v revmatu.

Klíčová slova: Polypeptidy, Protizánětlivý účinek.

Úvod.

Cílem této práce je zjistit protizánětlivý účinek některých proteinic hydrolisates (PL) pro které jsme měli předběžné experimentálních a klinických studií (2,3,4,5,6,7,8,11,13,15). V hydrolisates jsme testovali byly získány z koňského séra PL1 (Cantacuzino ústav – Bukurešť), z čistého Fluka caseine PL2.1 a od průmyslové caseine PL2.2 (ICCF- Bukurešť). Použili jsme test zánětu s karagenu a Freund adjuvantní artritidy na krys Wistar a guineea prasat.

Materiál a metody. PL-s se získá kyselou hydrolýzou. Zde jsou neměnné chemické konstanty pro každého PL. Jsou vyhnout ot antigenitu a pyrogenní látky příliš. Nemají žádné bílkoviny (testováno s kyselinou tři chlor octové, Kyselina sulphosalicilic, Kyselina reactives chloristá) ale mají polypepeptides s malou molekulovou hmotností (fosfowolframové reaktivní v kyselém prostředí). Aminové obsah dusíku (Moore a Stein metody), obsah dusíku (Lowry a Biuret metody), molekulová hmotnost v Sefadex G75 filtrace ve srovnání s čistými křivkami peptidy) byly stanoveny (1,10).

U zánětu s karagenu byly pořízeny tři skupiny deseti samců potkanů ​​kmene Wistar, 200-+10g hmotnost, na který byl ve správě 0.1 ml. Karagenu 1% v tlapě. PL-y byly spravovány peritoneální 5-ml/Kg-weight zvířat třicet minut před zánětlivých agent byl spravován. Při dvojitém srovnání využíváme fyziologického roztoku. Byly vyrobeny plethysmometrical stanovení objemu zadní tlapky (injekčně) v okamžiku, kdy počáteční, zahájení experimentu, na 2,4, a 24 hodin od karagenu očkování. Dávky PL-s, ukázal intables, byly vyjádřeny v mg mdrying Residium bez NaCl. To je účinná látka. Výsledky byly vyjádřeny Newbould Formule (9), které berou v úvahu snížení zánětu, pokud jde o počáteční hodnoty získané u zvířat svědků.

Pro kompletní Freund adjuvantní zánětu byla přijata řada šesti Wistar mare potkanů ​​pro každou skupinu. Byli injekci na základě příběhu s kompletní- Bacto Adjuvantní Difco (inaktivovaná Mycobacterium butiricum ve Freundově adjuvans) 0.1 ml v prvním a 28-tý dnů, do první a druhé skupiny zvířat. PL2.1 byla spravována intraperitoneum, mg / kg. zvíře (Léčivá látka), pouze na první skupině, každý den od prvního dne 43 dny dlouhé. Třetí skupina byla svědectví, normální zvířata.

Experiment trval 565 dny. To bylo následováno hmotnostní křivku, pletismometrical měření na pravé zadní tlapky a na 54-tý dnů anatomico – patologické poškození.

Pro experiment s guineea prasat, vezmeme pět zvířat, 350-+50g.weight, pro každou skupinu. První a druhá skupina byly injikovány 0.5 ml. Freund Adjuvantní v zadní tlapky, první a sedmé dny (14). Třetí skupina byla s normálními svědků zvířat. Experiment trval 14 dny. Na konci studie byly provedeny anatomico – patologické pozorování.

Výsledky.
Protizánětlivé účinky PL-s na karagenu experimentu.
Protizánětlivé působení PL-s na soud karagenu. Procento účinky na snížení zánětu.

Tabulka 1
Mg / kg 2H 4H 24H
PL1 5 8 12 43
PL2.1 1 36 50 34
PL2.2 1 19 24 4
Solný 5 ml. 0 0 0

Tabulka 2
Anti-pobuřující akce PL2.1 na soud karagenu. Procentní účinky snižuje zánět.
Dávky mg / kg 2H 24H
0.1 27 22

1.0 36 34
3.5 71 55
35.5 92 13

Z tabulky 1 můžeme pozorovat, že tři PL mají protizánětlivý účinek v různých stupních. Efektivní dávky v účinných látek jsou velmi nízké a účinky jsou stále dobré 24 hodin od Carrageean správy. Výsledky uvedené v tabulce 2 ukazují závislost protizánětlivého působení PL2.1 na dávkách a aby pro výpočet efektivní dávky 50% (ED50) grafickou metodou na probit. ED50 ve dvou dobu je 1.8 mg / kg. na 24 hodin. Z první tabulky je vidět, že i PL2.2, který je proteinic hydrolyzát, vyrobené z průmyslového caseine, má protizánětlivý účinek, ale nízká jedno (ve srovnání s PL1 a PL2.1), stejně jako můžeme vidět i v tabulce 1 že protizánětlivý účinek malých dávek polypeptidového řešení (všechny tři PL-s) k nulové vlivu fyziologického roztoku. Pro PL2.1 bylo stanoveno na akutní toxicitu při podávání intraperitoneum na myších. Ukázalo se smrtelnou dávku pro 50 procento (LD50) z 576 mg / kg. tělo. V takovém případě terapeutické hodnotě (LD50/ED50) je velmi příznivá.

Z tabulky 3 můžeme sledovat některé experimentální výsledky studie s adjuvantní Freund zánětu u krys.

Tabulka 3
Hodnota (znamená na 10 zvířata) z Wrightů zadní tlapky, v krychlových milimetrech.
Skupiny den experimentu počáteční 8 10
15 20 30 56 zvyšující se %
PL2.1 + Fr.Adj.
39 38 38 38 39 42 42 +7
Fr.Adj. 35 40 40 40 40 41 43 +23
Svědek 38 38 38 38 39 39 40 +5
Vývoj hmotnosti křivky (prostředky na 10 zvířata).
Den experimentálních skupin
počáteční 8 15 20 27 56 zvýšení %
PL2.1
Fr.Adj. 150 142 145 160 156 185 +23
Fr.Adj. 159 148 155 156 159 177 +11
Svědek 152 160 165 168 170 180 +18

Můžeme vědět, že anatomické- patologické škody s experimentálním artritidou s Freund adjuvans na potkanech jako experimentální miositis na guineea prasat s Freund adjuvans ukázal dystrofickými změnu, odumírání, limphocitis infiltrace: játra, slezina, ledvina, plíce, poškození chrupavky a capsula spoje. Všechny škody byly méně důležité u zvířat chráněných PL-s.

Závěry.
Experime nt, který je předmětem tohoto dokumentu vyplývá, že určitá kvalita polypepotides s malou molekulovou hmotností, realizován proteinového hydrolýzou z koňského séra nebo caseine, má protizánětlivé účinky. Tato vlastnost je k dispozici na velmi malé dávky. Je možné, aby se s ohledem na buněčnou zásah zlepšením poškození přímo enzymatickou, o chemických mediátorů nebo nepřímo thermodinamic úrovni.

Malá molekulová hmotnost tohoto polypeptidů a jejich tepelným stability (na 120 Celsia stupně) ujistěte se, že parenterální podání (v injekci). Absence antigenicity a bez pyrogenních látek, je další výhoda.

Jsme si mysleli, že tento výsledek může otevřít zájem v této nové léčebné cestě z revmatu a dalších zánětlivých stěžuje.

Odkazy.
1. Andrews P. Metody biochemické analýzy, Glik D. Interscience nakl., 1970, Vol.18
2. Bird J. (colab) Anti-zánětlivé funkce proteinových, Brit. J. Pharmacolo, 1979, 66, 455.
3. D'tri G. (s) Činnosti Lysartrosi nebo polypeptid serotoninu na inflamatione, Důl.
S., 1971, 62,3–4, 71.
4. G D'Atri (s) Činnosti Lysartrosi. Na. S., 1971, 62, 3-4, 89
5. Gomarasca P. (s) Činnosti Antibradichininica z Lysartrosi, Na. S., 1971, 3-4, 89
6. Gomarasca P. (s) Interatione tra Lysartrosi, Na. S, 1971, 3-4, 142
7. Holl I. (s) Anti-zánětlivé Činnosti v Aminocyanoborane a Aminocarboxiborane a příbuzné sloučeniny, Sch. Pharm. Sci. 1980, 60, 9, 1025.
8. Nagal K. (s) Anti-pobuřující akce L- karnosin, Artz. Forch., 1970, 20, 1876.
9. Newbould B.B. Brit. J. Pharmacol., 1963, 21, 127.
10. Moore S. (s) J. Bio. Chm., 1954, 211, 893.
11. Savulescu Alex. Svalový revmatismus, léčba desenzibilizace regionální, Rev.de povědomí, 1935, 1, 23.
12. Sãvulescu A.G. (s) Nespecifické léčbě revmatických artritidy a Ankilosante Sopondylite originálním způsobem, Acta Rheuma. Přístav. 1977, 5, 9,16.
13. Sãvulescu A.G. (s) Artritida Léčba Proteinic lyzátů, Acta Rheuma. Port., 1979, 7,1, 31.
14. Sima I. (s) Experimentální Myositis Polymyozitida morče Model pro lidská práva, CMR Scientific Session., 1981, Bukurešť.

Copyright © Geo Savulescu 2003