Den antiinflammatoriske virkning af ca proteintoksin Hydrolisates.

(Udgivet i “LIFE CARE”, Nej. 6, 1989, Når. 227-281)
M.R.Simionovici, HosmY Boesteanu, Dan Florica, Carmen Gheorghiu, Marilena Teodorescu, Til. Chirita
(Kemisk-Pharmaceutical Research Institute, Bukarest), A.G.Savulescu (Hospital Baloteşti, Ilfov)


 
Resumé.

Den antiinflammatoriske virkning af nogle proteintoksin hydrolisates (PL) blev testet på de eksperimentelle modeller af betændelse med carrageen på rotter og Freud adjuvansarthritis på rotter og på guineea svin. PL-s er: PL1 (hesteserum hydrolysat), PL2.1 og PL2.2 (kasein hydrolisate). Det hydrolisate har som aktivt middel en vis mængde og kvalitet af polypeptider med lidt molekylvægt undgås af antigenicitet, undgås af pyrogen stof og med en meget lille toksicitet. Alle tre PL-s testet havde anti-inflammatoriske virkninger. PL1 og PL2.1 havde en yderst gunstig terapeutisk værdi.

Disse resultater kan åbne en ny terapeutisk måde i inflammatoriske syndromer, især i rheumatical sygdomme.

Nøgleordene: Polypeptider, Anti-inflammatorisk effekt.

Indledning.

Formålet med dette oplæg er at kontrollere den anti-inflammatoriske effekt af nogle proteintoksin hydrolisates (PL) som vi havde indledende eksperimentelle og kliniske undersøgelser (2,3,4,5,6,7,8,11,13,15). De hydrolisates testede vi blev indhentet fra hesten serum den PL1 (Cantacuzino Institute – Bukarest), fra ren Fluka kasein PL2.1 og fra den industrielle kasein PL2.2 (ICCF- Bukarest). Vi brugte test af betændelse med Carrageen og Freund adjuvansarthritis om Wistarrotter og guineea svin.

Materiale og metoder. PL-s blev opnået ved sur hydrolyse. Her er ufravigelige kemiske konstanter for hver PL. De undgås ot antigenicitet og pyrogene stoffer også. De har ingen proteiner (testet med tre klor eddikesyre, sulphosalicilic syre, perchlorsyre reaktiver) men de har polypepeptides med ringe molekylvægt (phosphorwolfram reaktivt i surt medium). Aminisk nitrogenindhold (Moore og Stein metoder), kvælstofindhold (Lowry og biuret metoder), molekylvægt i Sefadex G75 filtrering sammenlignet med rene peptider kurver) blev fastsat (1,10).

For betændelse med Carrageen blev de taget tre grupper af ti Wistar hanrotter, 200-+10g vægt, som blev administreret 0.1 ml. Carrageen 1% i poten. PL-s blev administreret peritoneale 5-ml/Kg-weight dyr 30 minutter før flogistisk agent blev administreret. Til dobbelt sammenligning bruger vi saltvand. De var lavet plethysmometrical bestemmelse af omfanget af den bageste pote (indsprøjtet) ved første øjeblik, starten af ​​eksperimentet, ved 2,4, og 24 timer fra carrageenan inokulering. Doserne af PL-s, viste intables, blev udtrykt i milligram mdrying Residium uden NaCl. Dette er det aktive stof. Resultaterne blev udtrykt af Newbould formule (9), som overveje at reducere af betændelse i forhold til den oprindelige værdi, der opnås ved de afgivne dyr.

For Complete Freund Adjuvans betændelse det blev taget en række seks Wistar mare rotter for hver gruppe. De blev injiceret på grundlag af historien med Complete- Bacto Adjuvans Difco (inaktiverede Mycobacterium butiricum i Freund adjuvans) 0.1 ml i den første og den 28-th dage, til den første og anden gruppe af dyr. PL2.1 blev administreret intraperitoneum, mg / kg. dyr (aktivstof), kun i den første gruppe, hver dag fra den første dag 43 dage lange. Den tredje gruppe var vidne, normale dyr.

Forsøget varede 565 dage. Det blev fulgt vægtkurven, den pletismometrical måling af højre bageste pote og ved 54-th dage Anatomico – patologiske skader.

For eksperimentet med guineea grise vi tager fem dyr, 350-+50g.weight, for hver gruppe. Den første og den anden gruppe blev injiceret med 0.5 ml. Freund Adjuvans i den bageste pote, den første og den syvende dage (14). Den tredje gruppe var med normale vidner dyr. Forsøget varede 14 dage. Ved afslutningen af ​​forsøget blev foretaget Anatomico – patologiske observationer.

Resultater.
De anti-inflammatoriske virkninger af PL-s på Carrageen eksperimentet.
Anti-inflammatorisk virkning af PL-s på Carrageen retssagen. Procentvise effekt på at reducere inflammation.

Bord 1
Mg / kg 2H 4H 24T
PL1 5 8 12 43
PL2.1 1 36 50 34
PL2.2 1 19 24 4
Saline 5 ml. 0 0 0

Bord 2
Anti-inflammatorisk virkning af PL2.1 på Carrageen retssagen. Procent virkninger af at reducere inflammationen.
Doser mg / Kg 2H 24H
0.1 27 22

1.0 36 34
3.5 71 55
35.5 92 13

Fra tabel 1 Vi kan observere, at tre PL har anti-inflammatorisk virkning i forskellige grader. De effektive doser hos aktive stoffer er meget lave, og effekterne er stadig god 24 timer fra Carrageean administration. Resultaterne præsenteres i tabel 2 viser afhængighed af den anti-inflammatoriske virkning af PL2.1 af de doser og gøre det muligt at beregne de effektive doser 50% (ED50) den grafiske metode probit. ED50 på to timer 1.8 mg / kg. ved 24 timer. Fra den første tabel kan vi også se, at PL2.2 der er en proteintoksin hydrolisate, produceret fra den industrielle casein, har en anti-inflammatorisk virkning, men en lav én (sammenlignet med PL1 og PL2.1), såvel som vi kan se, selv i tabel 1 at den anti-inflammatoriske virkning af små doser af polypeptidpræparat opløsning (alle tre PL-s) mod nul virkning saltopløsning. For PL2.1 er det blevet bestemt den akutte giftighed ved intraperitoneum administration på mus. Det viste en dødelig dosis for 50 procent (LD50) af 576 mg / kg. krop. I et sådant tilfælde den terapeutiske værdi (LD50/ED50) er yderst gunstig.

Fra tabel 3 vi kan følge nogle eksperimentelle resultater af forsøg med Freunds adjuvans betændelse hos rotter.

Bord 3
Værdien (betyder på 10 dyr) af den wright bageste pote, i kubik millimeter.
Grupper Day of eksperiment indledende 8 10
15 20 30 56 stigende %
PL2.1 + Fr.Adj.
39 38 38 38 39 42 42 +7
Fr.Adj. 35 40 40 40 40 41 43 +23
Witness 38 38 38 38 39 39 40 +5
Udviklingen af ​​vægtkurven (betyder på 10 dyr).
Day of eksperiment Grupper
indledende 8 15 20 27 56 øge %
PL2.1
Fr.Adj. 150 142 145 160 156 185 +23
Fr.Adj. 159 148 155 156 159 177 +11
Witness 152 160 165 168 170 180 +18

Vi kan vide, at de anatomiske- patologiske skader med den eksperimentelle gigt med Freund adjuvans på rotter som den eksperimentelle miositis på guineea svin med Freund Adjuvans viste dystrofisk ændring, nekrose, limphocitis infiltration: lever, milt, nyre, lunger, beskadigelse af brusk og capsula af den fælles. Alle skader var mindre vigtigt på de dyr, der er beskyttet af PL-s.

Konklusioner.
Den experime nt, der har været genstand for dette papir viser, at en vis kvalitet af polypepotides med lidt molekylvægt, realiseret ved proteinkompleks hydrolisis af hesteserum eller kasein, har anti-inflammatoriske virkninger. Denne egenskab er til stede på et meget lille dosis. Det er muligt at have i betragtning en cellulær indgreb ved at forbedre den enzymatiske skade direkte, af kemiske mediatorer eller indirekte af thermodinamic niveau.

Den lille molekylvægt at polypeptider og deres termisk stabilitet (ved 120 Grad Celsius) sørg for parenteral administration (i injektion). Fraværet af antigenicitet og ingen pyrogene stoffer er en anden fordel.

Vi tænker, at dette resultat kan åbne en interesse i, at ny terapeutisk vejen for rheumatical sygdomme og andre inflammatoriske klager.

Referencer.
1. Andrews P. Metoder til Biokemisk Analyse, Glik D. Interscience publ., 1970, vol.18
2. Bird J. (colab) Anti-inflammatorisk funktion af protein, Brit. J. Pharmacolo, 1979, 66, 455.
3. D'tri G. (med) Aktiviteter Lysartrosi eller polypeptid af serotonin på inflamatione, Mine.
Med., 1971, 62,3–4, 71.
4. G D'Atri (med) Aktiviteter Lysartrosi. On. Med., 1971, 62, 3-4, 89
5. Gomarasca P. (med) Aktiviteter Antibradichininica af Lysartrosi, On. Med., 1971, 3-4, 89
6. Gomarasca P. (med) Interatione tra Lysartrosi, On. Med, 1971, 3-4, 142
7. Holl I. (med) Anti-inflammatorisk activitie af Aminocyanoborane og Aminocarboxiborane og relaterede forbindelser, Sch. Pharm. Sci. 1980, 60, 9, 1025.
8. Nagal K. (med) Anti-inflammatorisk aktion af L- dipeptidcarnosin, Artz. Forch., 1970, 20, 1876.
9. Newbould B.B. Brit. J. Pharmacol., 1963, 21, 127.
10. Moore S. (med) J. Bio. Chm., 1954, 211, 893.
11. Săvulescu Alex. Muskelinfiltrationer, behandling ved desensibilisering regional, Rev.de Awareness, 1935, 1, 23.
12. Sãvulescu A.G. (med) En uspecifik behandling af reumatisk gigt og Ankilosante Sopondylite af en original metode, Acta Rheuma. Port. 1977, 5, 9,16.
13. Sãvulescu A.G. (med) Gigt Behandling af proteintoksin Lysater, Acta Rheuma. Port., 1979, 7,1, 31.
14. Sima I. (med) Eksperimentel Myositis Polymyositis marsvin Model for Human, CMR Scientific Session., 1981, Bukarest.

Copyright © Geo Săvulescu 2003