El efecto antiinflamatorio de algunos proteínicos hidrolizados.

(Publicado en “CUIDADO DE VIDA”, No. 6, 1989, Una vez. 227-281)
M.R.Simionovici, Niculina Boesteanu, Dan Florică, Carmen Gheorghiu, Marilena Teodorescu, Al. Chirita
(Químico Farmacéutica Instituto de Investigación, Bucarest), A.G.Savulescu (Hospital de Baloteşti, Ilfov)


 
Resumen.

El efecto antiinflamatorio de algunos hidrolizados proteínicos (PL) fue probado en los modelos experimentales de la inflamación con carragenina en ratas y Freud artritis adyuvante en ratas y cerdos en guineea. El PL-s son: PL1 (hidrolizado de suero de caballo), PL2.1 y PL2.2 (caseína hidrolizado). El hidrolizado tiene como agente activo una cierta cantidad y calidad de polipéptidos con poco peso molecular evitado de antigenicidad, evitado de sustancia pirogénica y con una muy poca toxicidad. Los tres PL-s probado tenían efectos antiinflamatorios. PL1 y PL2.1 tenían un valor terapéutico muy favorable.

Estos resultados pueden abrir una nueva forma terapéutica en los síndromes inflamatorios, especialmente en enfermedades reumáticas.

Palabras clave: Los polipéptidos, Efecto antiinflamatorio.

Introducción.

El propósito de este trabajo es comprobar el efecto antiinflamatorio de ciertos hidrolizados proteicos (PL) para los que teníamos estudios experimentales y clínicos preliminares (2,3,4,5,6,7,8,11,13,15). Los hidrolizados que probamos se obtuvieron del suero de caballo al PL1 (Cantacuzino Instituto – Bucarest), de pura caseína PL2.1 Fluka y desde el PL2.2 caseína industrial (ICCF- Bucarest). Se utilizó la prueba de la inflamación con carragenina y el adyuvante Freund Artritis en las ratas Wistar y cerdos guineea.

Material y Métodos. El PL-s fueron obtenidos por hidrólisis ácida. Aquí son constantes químicas invariables para cada PL. Ellos se evitan antigenicidad ot y sustancias pirógenas demasiado. No tienen proteínas (probado con ácido acético tres cloruros, sulphosalicilic acid, reactivos de ácido perclórico) pero tienen polypepeptides con poco peso molecular (fosfotúngstico reactiva en medio ácido). Contenido de nitrógeno amínico (Métodos Moore y Stein), contenido de nitrógeno (Métodos de Lowry y Biuret), peso molecular en la filtración Sefadex G75 comparado con péptidos puras curvas) se establecieron (1,10).

Para la inflamación con carragenina que se tomaron tres grupos de diez ratas macho Wistar, 200-+10g de peso, a los que se administró 0.1 ml. Carragenina 1% en la pata. PL-s se administraron peritoneales 5-ml/Kg-weight animales treinta minutos antes de que el agente flogístico se administró. Por doble comparación utilizamos salina. Ellos se hicieron determinación plethysmometrical del volumen de la pata posterior (inyectado) en el momento inicial, el inicio del experimento, en 2,4, y 24 horas desde la inoculación carragenina. Las dosis de PL-s, mostró intables, se expresaron en miligramos mdrying Residium sin NaCl. Esta es la sustancia activa. Los resultados se expresaron por Newbould Formule (9), que considerar la reducción de la inflamación en relación con el valor inicial obtenido en los animales testigos.

Para la completa inflamación Freund adyuvante se tomó una serie de seis ratas Wistar yegua para cada grupo. Se inyectaron en la base de la historia con la completa- Bacto Difco adyuvante (butiricum Mycobacterium inactivada en adyuvante Freund) 0.1 ml en la primera y los días 28-th, a la primera y segundo grupo de animales. PL2.1 se administró intraperitoneum, mg / Kg. animal (sustancia activa), sólo en el primer grupo, cada día desde el primer día 43 días largos. El tercer grupo fue testigo de, animales normales.

El experimento duró 565 día. Le siguió la curva de peso, la medición pletismometrical de la pata posterior derecha y en el día 54-th el anatomico – daños patológicos.

Para el experimento con los cerdos guineea tomamos cinco animales, 350-+50g.weight, para cada grupo de. El primero y el segundo grupo se inyectaron con 0.5 ml. Freund adyuvante en la pata posterior, el primer y el séptimo día (14). El tercer grupo estaba con los animales normales de testigos. El experimento duró 14 día. Al final del ensayo se realizaron anatomico – observaciones patológicas.

Resultados.
Los efectos antiinflamatorios de la PL-s en el experimento Carragenina.
Acción anti-inflamatoria de PL-s en el juicio Carragenina. Efectos de porcentaje en la reducción de la inflamación.

Tabla 1
Mg / Kg 2H 4H 24H
PL1 5 8 12 43
PL2.1 1 36 50 34
PL2.2 1 19 24 4
Salina 5 ml. 0 0 0

Tabla 2
Acción anti-inflamatoria de PL2.1 sobre el juicio Carragenina. Efectos porcentuales de la reducción de la inflamación.
Dosis mg / Kg 2H 24H
0.1 27 22

1.0 36 34
3.5 71 55
35.5 92 13

De la Tabla 1 podemos observar que tres PL tienen efecto antiinflamatorio en diferentes grados. Las dosis eficaces en principios activos son muy bajos y los efectos siguen siendo buenas 24 horas de la administración Carrageean. Los resultados presentados en la Tabla 2 mostrar la dependencia de la acción anti-inflamatoria de PL2.1 en las dosis y permitir que para calcular las dosis eficaces 50% (ED50) por el método gráfico de la probit. La ED50 a las dos horas es 1.8 mg / Kg. en 24 horas. Desde la primera tabla podemos ver también que PL2.2 que es un hidrolizado proteico, producida a partir de la caseína industrial, tiene un efecto anti-inflamatorio, pero una baja (en comparación con PL1 y con PL2.1), así como podemos ver incluso en la Tabla 1 que el efecto anti-inflamatorio de pequeñas dosis de solución polipeptídica (todos los tres PL-s) hacia el efecto nulo de solución salina. Para PL2.1 se ha determinado la toxicidad aguda a la administración intraperitoneum en ratones. Se mostró una dosis letal para 50 por ciento (DL50) de 576 mg / Kg. cuerpo. En tal caso, el valor terapéutico (LD50/ED50) es muy favorable.

De la Tabla 3 podemos seguir algunos resultados experimentales de la prueba con la inflamación Freund adyuvante en ratas.

Tabla 3
El valor (significa en 10 animales) de la de la pata posterior de wright, en milímetros cúbicos.
Grupos Día del experimento inicial 8 10
15 20 30 56 creciente %
PL2.1 + Fr.Adj.
39 38 38 38 39 42 42 +7
Fr.Adj. 35 40 40 40 40 41 43 +23
Testigo 38 38 38 38 39 39 40 +5
La evolución de la curva de peso (significa en 10 animales).
Día de los grupos experimentales
inicial 8 15 20 27 56 aumentar %
PL2.1
Fr.Adj. 150 142 145 160 156 185 +23
Fr.Adj. 159 148 155 156 159 177 +11
Testigo 152 160 165 168 170 180 +18

Podemos saber que la anatomía- daños patológicos con la artritis experimental con Freund adyuvante en ratas como la miositis experimental en cerdos guineea con Freund adyuvante mostraron alteración distrófica, necrosis, limphocitis infiltración en: hígado, bazo, riñón, pulmones, el daño del cartílago y de la cápsula de la articulación. Todos los daños fueron menos importantes en los animales protegidos por el PL-s.

Conclusiones.
El nt experime que ha sido el objeto de este trabajo muestra que una cierta calidad de polypepotides con un poco de peso molecular, realizado por la hidrólisis proteica del suero de caballo o la caseína, tiene efectos antiinflamatorios. Esta propiedad se encuentra presente en una dosis muy pequeñas. Es posible tener a la vista una intervención celular mediante la mejora de los daños enzimática directamente, por mediadores químicos o indirectamente por el nivel termodinámico.

El poco peso molecular que los polipéptidos y su estabilidad termica (en 120 Grado Celsius) asegúrese de que la administración parenteral (en la inyección). La ausencia de antigenicidad y no hay sustancias pirógenas es otra ventaja.

Pensamos que este resultado puede abrir un interés en esa nueva forma terapéutica de las enfermedades reumáticas y con otra inflamatoria queja.

Referencias.
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