Działanie przeciwzapalne niektórych białkowych Hydrolisates.

(Opublikowano w “OCHRONA ŻYCIA”, Nie. 6, 1989, Raz. 227-281)
M.R.Simionovici, Tse Boesteanu, Dan Florica, Carmen Gheorghiu, Marilena Teodorescu, Do. Chirita
(Chemiczno-Instytut Farmaceutyczny, Bukareszt), A.G.Savulescu (Szpital Baloteşti, Ilfov)


 
Streszczenie.

Działanie przeciwzapalne pewnych białkowych hydrolisates (PL) badano na doświadczalnych modelach zapalenia z karagen na szczurach i Freud Adiuwantem stawów na szczurach i na świnie guineea. PL-y są: PL1 (hydrolizat surowicy końskiej), PL2.1 i PL2.2 (hydrolizat kazeiny). Hydrolizat zawiera jako substancję czynną pewnej ilości i jakości polipeptydów o małej masie cząsteczkowej uniknąć antygenowości, unikać substancji pirogenicznej i o bardzo małej toksyczności. Wszystkie trzy PL-y przetestowane miał działanie przeciwzapalne. PL1 i PL2.1 miał bardzo korzystną wartość terapeutycznie.

Wyniki te mogą otworzyć nowe terapeutycznie sposób w zespołach zapalnych, zwłaszcza w reumatycznymi.

Słowa kluczowe: Polipeptydy, Działanie przeciwzapalne.

Wprowadzenie.

Celem niniejszego artykułu jest sprawdzić działanie przeciwzapalne niektórych białkowych hydrolisates (PL) dla których mieliśmy wstępne badania eksperymentalne i kliniczne (2,3,4,5,6,7,8,11,13,15). W hydrolisates testowaliśmy uzyskano z surowicą końską PL1 (Cantacuzino Instytut – Bukareszt), z czystej Fluka kazeiny PL2.1 i od przemysłowej kazeiny PL2.2 (ICCF- Bukareszt). Zastosowano test z zapalenia się karagen i Freund Adjuvant stawów na szczurach rasy Wistar i świń guineea.

Materiał i metody. PL-a uzyskano w wyniku hydrolizy kwasowej. Oto niezmienne stałe chemiczne dla każdego PL. Ich unikać ot antygenowości i substancje zbyt pirogenne. Nie mają białka (przetestowane z trzech chlorków kwasu octowego, Kwas sulphosalicilic, reaktywne nadchlorowy) ale mają polypepeptides o małej masie cząsteczkowej (fosfowolframowego reaktywna w środowisku kwaśnym). Aminowe zawartość azotu (Moore i Stein metody), zawartość azotu (Lowry i metody biuretowe), masa cząsteczkowa w filtracji Sefadex G75 czystych peptydów w porównaniu z krzywymi) zostały ustanowione (1,10).

Do zapalenia z karagen zostały podjęte trzy grupy dziesięciu samców szczurów Wistar, 200-+10g masy, do której podawano 0.1 ml. Karagen 1% w łapy. PL-y były podawane otrzewnowej 5-ml/Kg-weight zwierząt trzydzieści minut przed środkiem zapalnych podawano. Na podwójnym porównaniu używamy soli fizjologicznej. Zostały wykonane plethysmometrical oznaczanie objętości tylnej łapy (wstrzykuje) w chwili początkowej, rozpoczęciem eksperymentu, w 2,4, i 24 godzin od zaszczepienia karagen. Dawki PL-s, pokazał intables, zostały wyrażone w miligramach mdrying Residium bez NaCl. Jest to substancja czynna. Wyniki wyrażono poprzez Newbould formule (9), które należy wziąć pod uwagę zmniejszenie zapalenia w odniesieniu do wartości początkowej uzyskanych na zwierzętach świadków.

Do kompletu zapalenia Freund Adjuvant została podjęta wiele sześciu szczurów Wistar mare dla każdej grupy. Zostały one wstrzykiwane na podstawie tale w kompletny- Bacto uzupełniające Difco (inaktywowane butiricum tuberculosis w adiuwantem Freunda) 0.1 ml w pierwszym i 28-ty dzień, do pierwszej i drugiej grupy zwierząt. PL2.1 podawano intraperitoneum, mg / kg. zwierzęcy (Substancja czynna), Tylko w pierwszej grupie, każdy dni od pierwszego dnia 43 dni długie. Trzecia grupa był świadkiem, normalne zwierzęta.

Doświadczenie trwało 565 dni. To było po krzywej masy ciała, pletismometrical pomiar prawej tylnej łapy, a na 54-ty dzień Anatomico – patologiczne uszkodzenia.

Dla eksperymentu ze świniami guineea bierzemy pięć zwierząt, 350-+50g.weight, dla każdej grupy. Pierwszą i drugą grupę wstrzyknięto 0.5 ml. Freund uzupełniające w tylnej łapy, pierwszy i siódmy dzień (14). Trzecia grupa była z normalnych zwierząt świadków. Doświadczenie trwało 14 dni. Pod koniec badania przeprowadzono Anatomico – patologiczne obserwacje.

Wyniki.
Efekt anty-zapalne, PL-s w eksperymencie karagen.
Działanie przeciwzapalne, PL-y na rozprawie karagen. Efekty procentowe na zmniejszenie stanu zapalnego.

Tabela 1
Mg / kg 2H 4H 24H
PL1 5 8 12 43
PL2.1 1 36 50 34
PL2.2 1 19 24 4
Słony 5 ml. 0 0 0

Tabela 2
Działanie przeciwzapalne PL2.1 na rozprawie karagen. Efekty procentowe zmniejszenie stanu zapalnego.
Dawka mg / kg 2H 24H
0.1 27 22

1.0 36 34
3.5 71 55
35.5 92 13

Z Tabeli 1 możemy zaobserwować, że trzy PL mają działanie przeciwzapalne w różnych stopniach. Skuteczna dawka substancji czynnych są bardzo niskie, a efekty są nadal dobre 24 godzin od podania Carrageean. Wyniki przedstawione w tabeli 2 pokazuje zależność działania przeciwzapalnego PL2.1 dotyczących dawek i pozwala na obliczenie skutecznych dawek 50% (ED50) przez graficzny metodą probitów. ED50 w dwóch godzinach 1.8 mg / kg. w 24 godzin. Z pierwszej tabeli widać również, że PL2.2 który jest hydrolizat białkowy, wytworzony z kazeiny przemysłowej, ma wpływ przeciwzapalny, ale niski jeden (w porównaniu z PL1 i PL2.1), jak również możemy zobaczyć nawet w tabeli 1 że działanie przeciwzapalne małych dawkach roztworu polypeptidic (Wszystkie trzy PL-s) ku zerowej efektu roztworu soli fizjologicznej. Na PL2.1 stwierdzono, ostrą toksyczność na podawaniu intraperitoneum na myszach. Pokazał śmiertelną dawkę dla 50 procent (LD50) z 576 mg / kg. ciało. W takim przypadku wartość terapeutyczna (LD50/ED50) jest bardzo korzystne.

Z Tabeli 3 możemy wykonać kilka wyniki eksperymentalne próby z zapaleniem Freund Adjuvant na szczurach.

Tabela 3
Wartość (myśli na 10 zwierzęta) z tylnej łapy z wright, w milimetrach sześciennych.
Grupa Dzień eksperymentu inicjału 8 10
15 20 30 56 wzrastający %
PL2.1 + Fr.Adj.
39 38 38 38 39 42 42 +7
Fr.Adj. 35 40 40 40 40 41 43 +23
Świadek 38 38 38 38 39 39 40 +5
Przebieg krzywej wagi (oznacza na 10 zwierzęta).
Dzień eksperymentu grup
początkowy 8 15 20 27 56 wzrost %
PL2.1
Fr.Adj. 150 142 145 160 156 185 +23
Fr.Adj. 159 148 155 156 159 177 +11
Świadek 152 160 165 168 170 180 +18

Możemy wiedzieć, że anatomiczne- odszkodowanie z patologicznych stawów doświadczalnych z adiuwantem Freunda na szczurach jak miositis eksperymentalnych świń guineea z adiuwantem Freunda dystroficzne zmiany pokazały, martwica, limphocitis infiltracji w: wątroba, śledziona, nerka, płuca, uszkodzeń chrząstki i capsula stawu. Wszystkie szkody były mniejsze znaczenie przy zwierząt chronionych przez PL-y.

Wnioski.
Nt experime który jest przedmiotem tego dokumentu wynika, że ​​pewne jakości polypepotides o małej masie cząsteczkowej, zrealizowane przez białkowej hydroliza w surowicy końskiej lub kazeiny, ma działanie przeciwzapalne. Obiekt ten jest obecny w bardzo małych dawkach. Możliwe jest, aby ze względu na interwencje komórkowej poprzez poprawę uszkodzenia bezpośrednio enzymatycznej, mediatory chemiczne lub pośrednio na poziomie thermodinamic.

Mała masa cząsteczkowa tego polipeptydów i ich stabilność termiczna (w 120 Stopień Celsjusza) upewnij się, że podawanie pozajelitowe (w iniekcji). Brak antygenowości substancji pirogenicznych i nie ma jeszcze jedną zaletę.

Myślimy, że ten wynik może otworzyć interes w tym nowym sposobie terapeutycznego reumatycznymi i inne zapalne narzeka.

Referencje.
1. Andrews P. Methods in Biochemical Analysis, Glik D. Interscience publ., 1970, Vol.18
2. Ptak J. (colab) Działanie przeciwzapalne białka, Brit. J. Pharmacolo, 1979, 66, 455.
3. D'tri G. (z) Działalność Lysartrosi lub polipeptyd serotoniny na inflamatione, Kopalnia.
Z., 1971, 62,3–4, 71.
4. G D'Atri (z) Działalność Lysartrosi. Na. Z., 1971, 62, 3-4, 89
5. Gomarasca P. (z) Działania Antibradichininica z Lysartrosi, Na. Z., 1971, 3-4, 89
6. Gomarasca P. (z) Interatione tra Lysartrosi, Na. Z, 1971, 3-4, 142
7. Holl I. (z) Activitie przeciwzapalne Aminocyanoborane i Aminocarboxiborane i związki pokrewne, Sch. Pharm. Sci. 1980, 60, 9, 1025.
8. Nagal K. (z) Działanie przeciwzapalne L- Karnozyna, Artz. Forch., 1970, 20, 1876.
9. Newbould B.B. Brit. J. Pharmacol., 1963, 21, 127.
10. Moore S. (z) J. Bio. Chm., 1954, 211, 893.
11. Savulescu Alex. Reumatyzm mięśni, leczenie przez odczulanie regionalnym, Rev.de Świadomość, 1935, 1, 23.
12. Sãvulescu A.G. (z) Nieswoiste leczenie reumatyczne zapalenie stawów i Ankilosante Sopondylite przez oryginalną metodę, Acta Rheuma. Port. 1977, 5, 9,16.
13. Sãvulescu A.G. (z) Leczenie zapalenia stawów lizatów białkowych, Acta Rheuma. Port., 1979, 7,1, 31.
14. Sima I. (z) Eksperymentalny Zapalenie mięśni Zapalenie wielomięśniowe świnka morska Wzór człowieka, CMR Sesja Naukowa., 1981, Bukareszt.

Copyright © Geo Savulescu 2003