Efect antiinflamator unor proteice Hydrolisates.

(Publicat în “VIATA MEDICALA”, Nu. 6, 1989, Odată. 227-281)
M.R.Simionovici, Niculina Boesteanu, Dan FLORICA, Carmen Gheorghiu, Marilena Teodorescu, La. Chirita
(Institutul de Cercetari Chimico-Farmaceutice, Bucuresti), A.G.Savulescu (Spitalul Balotesti, Ilfov)


 
Rezumat.

Efectul antiinflamator al unor hydrolisates proteice (PL) a fost testat pe modele experimentale de inflamație cu caragenină la șobolan și Freud Adjuvant Artrita pe șobolani și pe porci Guineea. PL-S sunt: PL1 (ser de cal hidrolizat), PL2.1 și PL2.2 (cazeină hidrolizat). Hidrolizat are ca agent activ o anumită cantitate și calitate de polipeptide cu greutate moleculară mică evitate de antigenitate, evitat de substanță pirogenă și cu un foarte mic de toxicitate. Toate trei PL-uri testate au avut efecte anti-inflamatorii. PL1 și PL2.1 a avut o valoare terapeutic extrem de favorabilă.

Aceste rezultate pot deschide un nou mod terapeutic in sindroame inflamatorii, în special în bolile reumatice.

Cuvinte-cheie: Polipeptide, Efect anti-inflamator.

Introducere.

Scopul acestei lucrări este acela de a verifica efectul anti-inflamator a unor hydrolisates proteice (PL) pentru care am avut studii experimentale și clinice preliminare (2,3,4,5,6,7,8,11,13,15). Cele hydrolisates testate au fost obținute din serul de cal PL1 (Institutul Cantacuzino – Bucuresti), din pura Fluka cazeina PL2.1 și de PL2.2 cazeina industrial (ICCF- Bucuresti). Am folosit testul a inflamatiei cu carrageen și adjuvant Freund artrita pe sobolani Wistar si porci Guineea.

Material și metode. PL-S-au obținut prin hidroliză acidă. Aici sunt constante chimice invariabile pentru fiecare PL. Ele sunt evitate antigenitatea ot și substanțelor pirogene prea. Ei nu au proteine (testat cu acid acetic trei clor, Acid sulphosalicilic, reactivi acid percloric) dar ei au polypepeptides cu greutate moleculară mică (fosfowolframic reactivă în mediu acid). Conținutul de azot aminic (Metode Moore și Stein), conținutul de azot (Metode de Lowry și biuret), greutate moleculară în filtrare Sefadex G75, comparativ cu peptide pure curbe) Au fost stabilite (1,10).

Pentru inflamație cu carrageen acestea au fost luate trei grupe de zece șobolani masculi Wistar, 200-+10g greutate, la care a fost administrat 0.1 ml. Carrageen 1% în laba. PL-uri s-au administrat peritoneale 5-ml/Kg-weight animale treizeci minute înainte ca agentul inflamator fost administrate. Pentru comparație dublu folosim salin. Ele au fost făcute determinarea plethysmometrical din volumul labei posterioare (injectat) la momentul inițial, începutul experimentului, la 2,4, și 24 ore de la inoculare carrageen. Dozele de PL-uri, a arătat intables, au fost exprimate în miligrame mdrying Residium fără NaCl. Aceasta este substanța activă. Rezultatele au fost exprimate prin formule Newbould (9), care ia în considerare reducerea inflamației în ceea ce privește valoarea inițială obținută la animalele martor.

Pentru complet inflamatia Freund adjuvant a fost luat un număr de șase șobolani Wistar Mare pentru fiecare grup. Ei au fost injectat la baza povestea cu Complete- Bacto Adjuvant Difco (butiricum Mycobacterium inactivat în Freund adjuvant) 0.1 ml în prima și cea de 28-lea zi, la primul și al doilea grup de animale. PL2.1 a fost administrat intraperitoneum, mg / Kg. animal (substanță activă), doar la primul grup, în fiecare zi de la prima zi 43 zile lungi. Al treilea grup a fost de martor, animalele normale.

Experimentul a durat 565 zi. Acesta a fost urmat curba greutății, măsurarea pletismometrical de drept labei posterioare și la 54-lea zi anatomo – daune patologice.

Pentru experiment cu porci Guineea luăm cinci animale, 350-+50g.weight, pentru fiecare grup. Primul și al doilea grup au fost injectate cu 0.5 ml. Freund adjuvant în laba posterioară, prima și a șaptea zi (14). Al treilea grup a fost cu animalele normale martor. Experimentul a durat 14 zi. La sfârșitul studiului au fost făcute anatomo – observațiile patologice.

Rezultate.
Efectele anti-inflamatorii ale PL-uri pe experiment carrageen.
Acțiune anti-inflamatorie a PL-uri cu privire la procesul carrageen. Efecte procentuale pe reducerea inflamatiei.

Masă 1
Mg / Kg 2H 4H 24H
PL1 5 8 12 43
PL2.1 1 36 50 34
PL2.2 1 19 24 4
Salin 5 ml. 0 0 0

Masă 2
Acțiune anti-inflamatorie a PL2.1 cu privire la procesul carrageen. Efectele procentuale din reducerea inflamației.
Dozele mg / Kg 2H 24H
0.1 27 22

1.0 36 34
3.5 71 55
35.5 92 13

Din tabelul 1 putem observa că cele trei PL au efect anti-inflamator, în diferite grade. Dozele eficiente în substanțe active sunt foarte mici, iar efectele sunt încă bune 24 de ore de la administrarea Carrageean. Rezultatele prezentate în Tabelul 2 arată dependența acțiunii antiinflamatorii a PL2.1 de dozele și permit de a calcula dozele eficiente 50% (ED50) prin metoda grafică a probit. ED50 puțin două ore este 1.8 mg / Kg. la 24 ore. Din primul tabel, putem vedea, de asemenea, că PL2.2 care este un hidrolizat proteic, produs din cazeină industriale, are un efect anti-inflamator, dar unul scăzut (comparativ cu PL1 și cu PL2.1), precum și am putea vedea chiar în tabelul 1 că efectul anti-inflamator de doze mici de soluție polipeptidică (toate trei PL-urile) spre efect nul de soluție salină. Pentru PL2.1 a fost determinat de toxicitate acută la administrarea intraperitoneum pe soareci. Aceasta a demonstrat o doză letală de 50 la sută (LD50) de 576 mg / Kg. corp. În acest caz valoarea terapeutică (LD50/ED50) este extrem de favorabilă.

Din tabelul 3 putem urmări unele rezultate experimentale ale studiului cu inflamatia Freund adjuvant la șobolani.

Masă 3
Valoarea (Adică pe 10 animale) de a posterior laba wright, în milimetri cubi.
Grupuri Ziua de experiment inițial 8 10
15 20 30 56 crescând %
PL2.1 + Fr.Adj.
39 38 38 38 39 42 42 +7
Fr.Adj. 35 40 40 40 40 41 43 +23
Martor 38 38 38 38 39 39 40 +5
Evoluția curbei de greutate (înseamnă pe 10 animale).
Zi de experiment Grupuri
inițială 8 15 20 27 56 crește %
PL2.1
Fr.Adj. 150 142 145 160 156 185 +23
Fr.Adj. 159 148 155 156 159 177 +11
Martor 152 160 165 168 170 180 +18

Să știm că anatomice- daune patologice cu artrita experimentală cu adjuvant Freund pe sobolani ca miositis experimentale pe porci Guineea cu adjuvant Freund a arătat modificări distrofice, necroză, infiltrare în limphocitis: ficat, splină, rinichi, plămâni, deteriorarea cartilajului și capsula a articulatiei. Toate pagubele au fost mai puțin importante la animalele protejate de către PL-S.

Concluzii.
NT experime care a făcut obiectul acestei lucrări arată că o anumită calitate de polypepotides, cu o greutate moleculară mică, realizat de hydrolisis proteic din ser de cal sau cazeina, are efecte anti-inflamatorii. Această proprietate este prezent cu doze foarte mici. Este posibil de a avea în vedere o intervenție celular prin îmbunătățirea daunele enzimatic direct, de mediatori chimici sau indirect de nivelul termodinamic.

Micul greutatea moleculară de care polipeptide și stabilitatea lor termica (la 120 Grade Celsius) asigurați-vă că administrarea parenterală (în injecție). Absența antigenitate și substanțe pirogene este un alt avantaj.

Ne gândim că acest rezultat poate deschide un interes în acest nou mod terapeutic al bolilor reumatice și alte inflamatorii plângerile.

Referințe.
1. Andrews P. Metode de analize biochimice, Glik D. Interscience publ., 1970, vol.18
2. Bird J. (colab) Funcția anti-inflamator de proteine, Brit. J. Farma, 1979, 66, 455.
3. D'tri G. (cu) Activitățile Lysartrosi sau polipeptide de serotonină pe inflamatione, Mină.
Cu., 1971, 62,3–4, 71.
4. G D'Atri (cu) Activități de Lysartrosi. Pe. Cu., 1971, 62, 3-4, 89
5. Gomarasca P. (cu) Activități Antibradichininica de Lysartrosi, Pe. Cu., 1971, 3-4, 89
6. Gomarasca P. (cu) Interatione tra Lysartrosi, Pe. Cu, 1971, 3-4, 142
7. Holl I. (cu) Activitie anti-inflamator de Aminocyanoborane și Aminocarboxiborane și conexe Compuși, Sch. Pharm. Sci. 1980, 60, 9, 1025.
8. Nagal K. (cu) Acțiune anti-inflamator de L- Carnosina, Artz. Forch., 1970, 20, 1876.
9. Newbould B.B. Brit. J. Pharmacol., 1963, 21, 127.
10. Moore S. (cu) J. Bio. Chm., 1954, 211, 893.
11. Sãvulescu Alex. Reumatism muscular, tratament de desensibilizare regional, Conștientizarea Rev.de, 1935, 1, 23.
12. Sãvulescu A.G. (cu) Un tratament nespecific de artrita reumatică și Ankilosante Sopondylite printr-o metodă originală, Acta Rheuma. Port. 1977, 5, 9,16.
13. Sãvulescu A.G. (cu) Artrita Tratamentul de proteice Lizatele, Acta Rheuma. Port., 1979, 7,1, 31.
14. Sima I. (cu) Miozita Experimentala a Cobaiului Model pentru Polimiozita Umana, Sesiunea Stiintifica CMR., 1981, Bucuresti.

Copyright © Geo Savulescu 2003