Den antiinflammatoriska effekten av cirka Proteinic Hydrolisates.

(Publicerad i “LIFE CARE”, Ingen. 6, 1989, När. 227-281)
M.R.Simionovici, Niculina Boesteanu, Dan Florica, Carmen Gheorghiu, Lena Teodorescu, Till. Chirita
(Kemisk-Pharmaceutical Research Institute, Bukarest), A.G.Savulescu (Hospital Baloteşti, Ilfov)


 
Sammandrag.

Den antiinflammatoriska effekten av vissa proteinic hydrolisates (PL) testades på de experimentella modeller av inflammation med karragenan på råttor och Freud Adjuvant artrit på råttor och på guineea grisar. PL-s är: PL1 (hästserum hydrolysat), PL2.1 och PL2.2 (kasein hydrolisate). Den hydrolisate har som aktivt medel en viss kvantitet och kvalitet av polypeptider med liten molekylvikt undviks av antigenicitet, undvikas av pyrogent ämne och med en mycket liten toxicitet. Alla tre PL-s testade hade anti-inflammatoriska effekter. PL1 och PL2.1 hade en extremt gynnsam terapeutiskt värde.

Dessa resultat kan öppna ett nytt terapeutiskt sätt inflammatoriska syndrom, speciellt i reumatiska sjukdomar.

Nyckelord: Polypeptider, Anti-inflammatorisk effekt.

Inledning.

Syftet med denna uppsats är att kontrollera den antiinflammatoriska effekten av vissa proteinic hydrolisates (PL) som vi hade preliminära experimentella och kliniska studier (2,3,4,5,6,7,8,11,13,15). De hydrolisates vi testade erhölls från hästserum den PL1 (Cantacuzino Institute – Bukarest), från ren Fluka kasein PL2.1 och från industri kasein PL2.2 (ICCF- Bukarest). Vi använde test av inflammation med karragenan och Freund Adjuvant Arthritis på Wistar råttor och guineea grisar.

Material och metoder. PL-ar erhölls genom sur hydrolys. Här är oföränderliga kemiska konstanter för varje PL. De undviks ot antigenicitet och pyrogena ämnen för. De har inga proteiner (testades med tre klor ättiksyra, sulphosalicilic syra, perklorsyra Reactives) men de har polypepeptides med liten molekylvikt (fosfor reaktiva i surt medium). Aminkvävehalt (Moore och Stein metoder), kvävehalten (Lowry och biuret metoder), molekylvikt i Sefadex G75 filtrering jämfört med rena peptider kurvor) fastställdes (1,10).

För inflammation med karragenan de togs tre grupper om tio Wistar hanråttor, 200-+10g vikt, till vilken administrerades 0.1 ml. Karragen 1% i tassen. PL-s administrerades peritoneal 5-ml/Kg-weight djur trettio minuter innan flogistiska medlet administrerades. För dubbel jämförelse använder vi saltlösning. De gjordes plethysmometrical bestämning av volymen av den bakre tassen (injicerad) i det inledande ögonblick, starten av experimentet, vid 2,4, och 24 timmar från karragenan ympning. Doserna av PL-s, visade intables, uttrycktes i mg mdrying Residium utan NaCl. Detta är den aktiva substansen. Resultaten uttrycktes av Newbould formule (9), som anser att minska på inflammationen i fråga om det ursprungliga värdet vid vittnes djuren.

För komplett Freund Adjuvant inflammation det togs ett antal sex Wistar mare råttor för varje grupp. De injicerades på grundval av historien med Komplett- Bacto Adjuvant Difco (inaktiverad Mycobacterium butiricum i Freunds adjuvans) 0.1 ml i den första och den 28: te dagar, till den första och andra gruppen av djur. PL2.1 administrerades intraperitoneum, mg / kg. djur (aktiv substans), Endast vid den första gruppen, varje dag från den första dagen 43 dagar långa. Den tredje gruppen var av vittne, normala djur.

Experimentet varade 565 dagar. Det följdes viktkurvan, den pletismometrical mätning av rätt bakre tassen och vid 54: te dagar Anatomico – patologiska skador.

För experimentet med guineea svinen tar vi fem djur, 350-+50g.weight, för varje grupp. Den första och den andra gruppen injicerades med 0.5 ml. Freunds adjuvans i den bakre tassen, den första och den sjunde dagen (14). Den tredje gruppen var med normala vittnes djur. Experimentet varade 14 dagar. Vid slutet av försöket gjordes Anatomico – patologiska observationer.

Resultat.
De antiinflammatoriska effekter av PL-s på karragenan experimentet.
Anti-inflammatorisk verkan av PL-s på karragen försök. De procentuella effekter på att minska inflammationen.

Bord 1
Mg / kg 2H 4H 24H
PL1 5 8 12 43
PL2.1 1 36 50 34
PL2.2 1 19 24 4
Saltlösning 5 ml. 0 0 0

Bord 2
Anti-inflammatorisk verkan PL2.1 på karragenan rättegången. Procentuella effekterna av att minska inflammation.
Doser mg / kg 2H 24H
0.1 27 22

1.0 36 34
3.5 71 55
35.5 92 13

Från Tabell 1 Vi kan konstatera att tre PL har anti-inflammatorisk effekt i olika grad. De effektiva doserna i aktiva substanser är mycket låga och effekterna är fortfarande bra 24 timmar från Carrageean administration. De resultat som presenteras i tabellen 2 visar beroendet av den antiinflammatoriska verkan av PL2.1 på doserna och tillåta att beräkna de effektiva doser 50% (ED50) genom den grafiska metoden enligt probit. ED50 på två timmar är 1.8 mg / kg. vid 24 timmar. Från den första tabellen kan vi också se att PL2.2 som är en proteinic hydrolisate, producerad från den industriella kasein, har en anti-inflammatorisk verkan, men en låg en (jämfört med PL1 och med PL2.1), samt kan vi se även i tabell 1 att den antiinflammatoriska effekten av små doser av polypeptidsekvensen lösning (alla tre PL-s) mot null effekten av saltlösning. För PL2.1 det har bestämts att den akuta toxiciteten vid intraperitoneum administrering på möss. Den visade en dödlig dos för 50 procent (LD50) av 576 mg / kg. kropp. I ett sådant fall den terapeutiska värde (LD50/ED50) är extremt gynnsam.

Från Tabell 3 vi kan följa några experimentella resultat av försök med Freund Adjuvant inflammation på råttor.

Bord 3
Värdet (detta på 10 djur) av den Wright posterior tass, i kubikmillimeter.
Grupper Dagen experiment initial 8 10
15 20 30 56 ökande %
PL2.1 + Fr.Adj.
39 38 38 38 39 42 42 +7
Fr.Adj. 35 40 40 40 40 41 43 +23
Vittne 38 38 38 38 39 39 40 +5
Utvecklingen av viktkurvan (organ på 10 djur).
Dag för experimentgrupper
initial 8 15 20 27 56 öka %
PL2.1
Fr.Adj. 150 142 145 160 156 185 +23
Fr.Adj. 159 148 155 156 159 177 +11
Vittne 152 160 165 168 170 180 +18

Vi får veta att den anatomiska- patologiska skador med experimentell artrit med Freund Adjuvant på råttor som den experimentella miositis på guineea grisar med Freund Adjuvant visade dystrofisk förändring, nekros, limphocitis infiltration i: lever, mjälte, njure, lungor, skador på brosk och capsula av det gemensamma. Alla skadorna var mindre viktiga på djuren skyddas av PL-s.

Slutsatser.
Den experime nt som har varit föremål för denna uppsats visar att en viss kvalitet på polypepotides med en liten molekylvikt, realiseras av protein hydrolisis av hästserum eller kasein, har anti-inflammatoriska effekter. Den här egenskapen är närvarande vid en mycket liten dos. Det är möjligt att ha i tanke en cellulär ingripande genom att förbättra den enzymatiska skada direkt, av kemiska mediatorer eller indirekt av thermodinamic nivå.

Den lilla molekylvikt som polypeptider och deras termisk stabilitet (vid 120 Grader celsius) se till att parenteral administration (i injektion). Frånvaron av antigenicitet och inga pyrogena ämnen är en annan fördel.

Vi tänker att detta resultat kan öppna ett intresse för det nya terapeutiska vägen för reumatiska sjukdomar och andra inflammatoriska klagar.

Referenser.
1. Andrews P. Methods of Biochemical Analysis, Glik D. Interscience publ., 1970, vol.18
2. Bird J. (Colab) Antiinflammatoriskt Funktion hos Protein, Brit. J. Pharmacolo, 1979, 66, 455.
3. D'tri G. (med) Verksamhet i Lysartrosi eller polypeptid av serotonin på inflamatione, Mine.
Med., 1971, 62,3–4, 71.
4. G D'Atri (med) Verksamhet i Lysartrosi. På. Med., 1971, 62, 3-4, 89
5. Gomarasca P. (med) Aktiviteter Antibradichininica av Lysartrosi, På. Med., 1971, 3-4, 89
6. Gomarasca P. (med) Interatione tra Lysartrosi, På. Med, 1971, 3-4, 142
7. Holl jag. (med) Antiinflammatoriska activitie av Aminocyanoborane och Aminocarboxiborane och liknande föreningar, Sch. Pharm. Sci. 1980, 60, 9, 1025.
8. Nagal K. (med) Antiinflammatoriska verkan av L- karnosin, Artz. Forch., 1970, 20, 1876.
9. Newbould B.B. Brit. J. Pharmacol., 1963, 21, 127.
10. Moore S. (med) J. Bio. CHM., 1954, 211, 893.
11. Savulescu Alex. Muskelreumatism, behandling med hyposensibilisering regionalt, Rev.de Medvetenhet, 1935, 1, 23.
12. Sãvulescu A.G. (med) En icke-specifik behandling av reumatisk artrit och Ankilosante Sopondylite genom en originell metod, Acta Rheuma. Port. 1977, 5, 9,16.
13. Sãvulescu A.G. (med) Artrit behandling genom Proteinic Lysat, Acta Rheuma. Port., 1979, 7,1, 31.
14. Sima jag. (med) Experimentell Myosit Polymyosit marsvin modell för human, CMR Scientific Session., 1981, Bukarest.

Copyright © Geo Savulescu 2003